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2009年6月,美国北卡罗来纳州一个高尔夫俱乐部将高尔夫球场上的发病匍匐剪股颖Penn G-2样本送到美国密西根州立大学草坪病害诊断实验室进行鉴定。样品症状为枯萎,衰退,叶尖端以下典型坏死。镜检后排除真菌病害。症状类似于Xanthomonas translucens pv. poae引起的一年生早熟禾细菌性萎蔫病。镜检所有样品切片均可见细菌溢出。
取叶片组织进行分离,在室温下培养5天,从梯度稀释的平板上可观察到三个有单菌落的纯培养。培养5天后做接种实验,选择温室盆栽大小均一的5周左右的Penn G-2幼苗进行接种,用灭菌刀片在健康植株上切开伤口,将菌液滴在伤口上,做三个重复。用于接种的三个分离物接种后两天只有一个在叶尖出现轻微的褐色,症状进一步扩展,接种后5天可观察到叶片变褐,扭曲,顶端枯死至叶鞘。取叶片尖端切开后在显微镜下可见细菌溢出。从接种发病的植株上可分离到和接种相同的病菌。分离物经16srDNA扩增测序进行鉴定,病菌属于Acidovorax属,和Acidovorax avenae subsp. avenae同源性为100%。随后从发病植株上分离到不发荧光,好氧,革兰氏阴性的分离物。
在日本也有Acidovorax属的成员被鉴定为匍匐剪股颖病害的病原菌。这是美国首次报道Acidovorax spp. 引起匍匐剪股颖细菌病害。 |